Kromatogram za ono što jest i vrste



kromatograma je dvodimenzionalni grafički zapis dobiven u upijajućem mediju, koji pokazuje odvajanje tvari kromatografijom. Na kromatogramu se oblikuje vidljivi uzorak, pik ili mrlje, koje odražavaju fizičko odvajanje komponenti smjese.

Donja slika je kromatogram s tri pika, A, B i C, tri komponente uzorka odvojene kromatografijom. Primijećeno je da svaki od tri vrha ima različitu visinu i položaj u vremenskoj osi kromatograma.

Osi ordinata ili Y bilježe podatke o jačini signala (u ovom slučaju u milivoltima mV). Predstavlja registar, ovisno o detektoru, o nekim fizičkim svojstvima tvari ili zasebne komponente smjese.

Visina vrha proporcionalna je koncentraciji odvojene komponente uzorka u optimalnom sustavu. Tako je, na primjer, lako zamisliti da je komponenta B u većem udjelu od A i C.

Na apscisi ili osi X prikazano je vrijeme zadržavanja komponenti uzorka ili smjese. To je vrijeme koje prolazi od ubrizgavanja uzorka dok se ne zaustavi, što je različito za svaku čistu tvar.

indeks

  • 1 Što je kromatogram??
    • 1.1 Identifikacija tvari
    • 1.2 Klasifikacija čistoće tvari
    • 1.3 Kvantifikacija tvari
  • 2 Vrste
    • 2.1. Kromatogrami na papiru ili tankom filmu
    • 2.2. Kromatogrami dobiveni detektorima
  • 3 Reference

Što je kromatogram??

To je konačni zapis cjelokupnog kromatografskog procesa. Iz nje se dobivaju parametri analitičkog interesa. To se može dobiti kao elektronička datoteka, tiskani histogram ili u procesu podrške; na primjer, na papiru.

Os Y generira se detektorima signala ili intenzitetom odgovora, kao što su spektrofotometri. Neophodna je optimalna analiza vremena, karakteristika dobivenih pikova ili točkica; veličinu, lokaciju, boju, između ostalog.

Analize kromatograma općenito zahtijevaju upotrebu kontrola ili standarda, tvari identiteta i poznate koncentracije. Analiza tih kontrola omogućuje usporedbu s uzorcima karakterističnim za ispitivane uzorke.

U kromatogramu možete promatrati i analizirati kako je provedeno odvajanje komponenti smjese. Njegova optimalna studija omogućuje identificiranje tvari, dokazivanje njezine čistoće, kvantificiranje količine tvari prisutnih u smjesi, između ostalog.

Izvučene informacije mogu biti kvalitativne prirode; na primjer, kada se utvrde tvari i odredi njihova čistoća. Kvantitativne informacije odnose se na određivanje broja komponenti smjese i koncentracije odvojenog analita.

Identifikacija tvari

Analizom rezultata kromatograma mogu se identificirati različite tvari uspoređujući vremena retencije s onima poznatih tvari. Može se promatrati ako ispitivane tvari putuju istom udaljenosti ako imaju isto vrijeme kao i poznate tvari.

Na primjer, kromatogram omogućuje detektiranje i identifikaciju u urinu sportskih metabolita lijekova kao što su stimulansi i steroidi. To je važna potpora u proučavanju i istraživanju nekih metabolita proizvedenih genetskim poremećajima u novorođenčadi.

Kromatogram olakšava detekciju halogeniranih ugljikovodika prisutnih u vodi za piće, između ostalih tvari. Neophodan je u laboratorijskoj analizi kontrole kvalitete, jer omogućuje detektiranje i identifikaciju kontaminanata prisutnih u različitim proizvodima.

Klasifikacija čistoće tvari

U kromatogramu možete razlikovati čiste i nečiste tvari. Čista tvar bi proizvela jedan pik u kromatogramu; dok bi nečista tvar proizvela dva ili više vrhova.

Adekvatnim podešavanjem uvjeta pod kojima se provodi kromatografija, dvije tvari mogu se spriječiti da formiraju jedan pik.

Kvantifikacija tvari

Analizom površine vrhova kromatograma može se izračunati koncentracija komponenata uzorka.

Stoga je površina vrha proporcionalna količini tvari prisutne u uzorku. Ovi kvantitativni podaci dobiveni su u visoko osjetljivim sustavima, kao što su oni koji stvaraju plin ili tekuće kromatografije, na primjer.

vrsta

Jedna od klasifikacija kromatograma usko je povezana s različitim tipovima kromatografije, koji generiraju odgovarajući kromatogram.

Ovisno o uvjetima izvedbe detektora, između ostalog, kromatogram će se razlikovati po sadržaju i kvaliteti.

Kromatogrami na papiru ili tankom filmu

Kromatogram se može generirati izravno na papiru ili tankom filmu, izravno pokazujući raspodjelu ili distribuciju komponenti uzorka.

To je vrlo korisno za odvajanje i proučavanje obojenih tvari koje imaju prirodne pigmente, kao što je klorofil. Može se podvrgnuti razvojnim procesima u slučaju da tvari nemaju prirodnu boju i korisne su za kvalitativne studije.

Kromatogrami koje generiraju detektori

Kromatogram se također može dobiti uporabom detektora koji bilježi odziv, izlaz ili konačni signal kromatografije. Kao što je već spomenuto, ovaj detektor je obično spektrofotometar, maseni spektrometar, automatski sekvencer, elektrokemikalija, između ostalih..

Kromatogrami stvoreni u kolonama, bilo plinova, bilo tekućina, kao i onih visoke rezolucije u tankom sloju, koriste detektore.

Ovisno o vrsti detektora, kromatogram se može klasificirati kao diferencijalni ili integralni, ovisno o obliku odziva detektora.

Diferencijalni kromatogram

Diferencijalni detektor kontinuirano mjeri odzivni signal kromatograma, dok integralni detektori kumulativno mjere odgovarajući signal.

Različiti kromatogram je kromatogram dobiven diferencijalnim detektorom. Među tim detektorima mogu se spomenuti, na primjer, spektrofotometri i detektori promjena u električnoj vodljivosti.

Ovaj tip kromatograma pokazao je rezultat odvajanja aniona iz uzorka, detektiranog posrednom fotometrijom. Isti rezultati su dobiveni za proučavanje iona, na primjer, s konačnom detekcijom pomoću konduktometrije.

Gornji grafikon prikazuje primjer diferencijalnog kromatograma dobivenog pomoću automatskih DNA sekvencera (deoksiribonukleinska kiselina). Grafikon jasno pokazuje vrhove četiriju boja, jednu boju za svaku od DNA dušičnih baza.

Podrškom kompjutoriziranog programa olakšava se interpretacija slijeda analiziranih baza DNA, kao i za složenije analite..

Sveobuhvatni kromatogram

Integrirani kromatogram odgovara onome dobivenom pomoću integralnog detektora. Na ovom kromatogramu se pokazuje izlaz jedne komponente koja se ispituje. Nema maksimuma kao u diferencijalu.

Na integralnom kromatogramu dobiva se zapis s oblikom opisanim kao korak. Ovaj obrazac je dio kromatograma koji odgovara količini jedne tvari koja napušta stupac.

reference

  1. Bhanot, D. (2013). Kako čitati na kromatogram? Preuzeto s: lab-training.com
  2. Carey, F.A. (2006). Organska kemija Šesto izdanje. Mc Graw Hill
  3. Kromatografija danas. (2014). Što je kromatogram? Preuzeto s: chromattoday.com
  4. Mathias, J. (2018). Vodič za početnike: Kako protumačiti plinsku kromatografiju Rezultati kromatografije masene spektrometrije. Preuzeto s: innovatechlabs.com
  5. Španjolsko društvo za kromatografiju i srodne tehnike. (2014). Kromatogram. Oporavio se od: secyta.es
  6. Wikipedia. (2019). Papirna kromatografija. Preuzeto s: wikipedia.org