Nefelometrija u čemu se sastoji i primjena



nefelometrijskim sastoji se u mjerenju zračenja uzrokovanog česticama (u otopini ili u suspenziji), čime se mjeri snaga raspršenog zračenja pod kutom drugačijim od smjera upadnog zračenja.

Kada se čestica u suspenziji postigne zrakom svjetlosti, postoji dio reflektiranog svjetla, drugi dio se apsorbira, drugi dio se preusmjerava i ostatak se prenosi. Zato, kada svjetlost udari u prozirni medij u kojem se nalazi suspenzija krutih čestica, suspenzija se opaža zamućeno.

indeks

  • 1 Što je nefelometrija??
    • 1.1 Disperzija zračenja čestica u otopini
    • 1.2 Nefelometar
    • 1.3 Odstupanja
    • 1.4 Mjeriteljske značajke
  • 2 Programi
    • 2.1 Detekcija imunih kompleksa
    • 2.2 Ostale primjene
  • 3 Reference

Što je nefelometrija??

Raspršivanje zračenja česticama u otopini

U trenutku kada snop svjetlosti udari u čestice tvari u suspenziji, smjer širenja snopa mijenja smjer. Ovaj učinak ovisi o sljedećim aspektima:

1.Dimenzije čestice (veličina i oblik).

2. Karakteristike suspenzije (koncentracije).

3. Valna duljina i intenzitet svjetlosti.

4. Udaljenost upadne svjetlosti.

5. Kut otkrivanja.

6. Indeks refrakcije medija.

nefelometrom

Nefelometar je instrument koji se koristi za mjerenje čestica suspendiranih u tekućem uzorku ili u plinu. Dakle, fotoćelija postavljena pod kutom od 90 ° u odnosu na izvor svjetlosti detektira zračenje čestica prisutnih u suspenziji.

Također, svjetlost koju čestice reflektiraju prema fotoćeliji ovisi o gustoći čestica. Dijagram 1 prikazuje osnovne komponente koje čine nefelometar:

. Izvor zračenja

U nefelometriji je od vitalne važnosti imati izvor zračenja s visokim svjetlosnim učinkom. Postoje različite vrste, od ksenonskih žarulja i žarulja sa živinom parom, volframovih halogenih žarulja, laserskog zračenja, između ostalih.

B. Monokromatski sustav

Ovaj se sustav nalazi između izvora zračenja i kivete, tako da se na taj način izbjegava upad na kivetu zračenja s različitim valnim duljinama u odnosu na željeno zračenje..

Inače bi reakcije fluorescencije ili učinci zagrijavanja u otopini uzrokovali odstupanja od mjerenja.

C. Čitanje kivete

To je općenito prizmatični ili cilindrični spremnik i može imati različite veličine. U ovom je rješenje u studiju.

D. detektor

Detektor se nalazi na određenoj udaljenosti (obično vrlo blizu spremnika) i odgovoran je za otkrivanje zračenja raspršenog česticama suspenzije.

E. Sustav čitanja

Općenito, riječ je o elektroničkom stroju koji prima, pretvara i obrađuje podatke koji su u ovom slučaju mjerenja dobivena iz provedene studije.

odstupanja

Svako mjerenje podliježe postotku pogreške, koji se uglavnom daje:

Onečišćene kante: u kivetama bilo koje sredstvo izvan ispitivane otopine, koje je unutar ili izvan kivete, smanjuje svjetlost zračenja na putu do detektora (neispravne kivete, prašina zalijepljena za zidove kivete).

smetnje: prisutnost nekih mikrobnih kontaminanata ili zamućenosti raspršuje zračnu energiju, povećavajući intenzitet disperzije.

Fluorescentni spojeviTo su spojevi koji, pobuđujući uslijed zračenja, uzrokuju pogrešna i visoka očitanja gustoće disperzije.

Očuvanje reagensa: neadekvatna temperatura sustava može prouzročiti nepovoljne uvjete za proučavanje i potaknuti prisutnost mutnih reagensa ili taloga.

Promjene u električnoj energiji: kako bi se izbjeglo da upadno zračenje bude izvor pogreške, preporučuju se stabilizatori napona za jednolično zračenje.

Mjeriteljske značajke

Budući da je snaga zračenja otkrivenog zračenja izravno proporcionalna masenoj koncentraciji čestica, nefelometrijske studije imaju u teoriji veću mjeriteljsku osjetljivost od drugih sličnih metoda (kao što je turbidimetrija)..

Osim toga, ova tehnika zahtijeva razrijeđene otopine. To omogućuje da se minimiziraju i pojave apsorpcije i refleksije.

aplikacije

Nefelometrijske studije zauzimaju vrlo važno mjesto u kliničkim laboratorijima. Primjene se kreću od određivanja imunoglobulina i proteina akutne faze, komplementa i koagulacije.

Detekcija imunih kompleksa

Kada biološki uzorak sadrži antigen od interesa, on se miješa (u puferskoj otopini) s antitijelom da se formira imunološki kompleks.

Nefelometrija mjeri količinu svjetlosti koja se raspršuje reakcijom antigen-antitijelo (Ag-Ac), i na taj način otkrivaju imunološki kompleksi..

Ova se studija može provesti na dva načina:

Nefelometrija završne točke:

Ova tehnika se može koristiti za analizu krajnje točke, u kojoj je antitijelo biološkog uzorka koje se proučava inkubirano 24 sata..

Ag-Ac kompleks se mjeri pomoću nefelometra, a količina raspršene svjetlosti uspoređuje se s istim mjerenjem provedenim prije formiranja kompleksa.

Kinetička nephelometrija

U ovoj metodi se kontinuirano prati brzina formiranja kompleksa. Brzina reakcije ovisi o koncentraciji antigena u uzorku. Ovdje se mjerenja uzimaju kao funkcija vremena, tako da se prvo mjerenje uzima u trenutku "nula" (t = 0).

Kinetička nephelometrija je najčešće korištena tehnika, budući da se istraživanje može provesti za 1 sat, u usporedbi s dugim vremenskim razdobljem metode krajnje točke. Omjer disperzije mjeri se odmah nakon dodavanja reagensa.

Stoga, sve dok je reagens konstantan, količina prisutnog antigena smatra se izravno proporcionalnom brzini promjene.

Ostale aplikacije

Nefelometrija se općenito koristi u analizi kemijske kvalitete vode, za određivanje jasnoće i za kontrolu procesa njezine obrade.

Također se koristi za mjerenje onečišćenja zraka, pri čemu se koncentracija čestica određuje iz disperzije koju proizvode u incidentnom svjetlu..

reference

  1. Britannica, E. (s.f.). Nefelometrija i turbidimetrija. Oporavio se od britannica.com
  2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrija i nefelometrija. Preuzeto s pdfs.semanticscholar.org
  3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Oporavio se od technochemical.com
  4. Morais, I. V. (2006). Turbidimetrijska i nefelometrijska analiza protoka. Preuzeto s repositorio.ucp.p
  5. Sasson, S. (2014). Principi nefelometrije i turbidimetrije. Preuzeto s notesonimmunology.files.wordpress.com
  6. Stanley, J. (2002). Osnove imunologije i serologije. Albany, NY: Thompson Learning. Preuzeto s books.google.co.ve
  7. Wikipedia. (N. D.). Nefelometrija (medicina). Preuzeto s en.wikipedia.org