Vrste biokemijskih testova, za što su važni

biokemijska ispitivanja u mikrobiologiji oni su skup kemijskih testova koji se provode na mikroorganizmima prisutnim u uzorku kako bi ih se identificiralo; Ti mikroorganizmi su obično bakterije. Postoji veliki broj biokemijskih testova koji su dostupni mikrobiologu.

Međutim, izbor ovih testova temelji se na preliminarnim nalazima, kao što je Gramov uzorak boje i znakove rasta, koji omogućuju da bakterije budu dodijeljene određenoj kategoriji. Biokemijski testovi temelje se uglavnom na metaboličkim svojstvima svake vrste bakterija. 

Ne posjeduju sve bakterije ista svojstva, pa se istražuje ima li određeni enzim dodavanjem supstrata i čekajući da se reakcija dogodi. Obično se ovo određivanje mijenja promjenom boje ili pH u mediju za kulturu.

Manje od 15 biokemijskih testova često je potrebno za pouzdanu identifikaciju bakterije do razine vrste. Izvođenje više biokemijskih testova može povećati povjerenje u identifikaciju.

Većina tih biokemijskih testova provodi se u serumu ili krvnoj plazmi. Međutim, oni se također mogu izvoditi u drugim biološkim sekretima kao što su urin, cerebrospinalna tekućina, pleuralna tekućina i stolica, među ostalima..

indeks

• 1 Klasifikacija
  • 1.1 Univerzalno
  • 1.2 Razlike
  • 1.3
• 2 Vrste biokemijskih ispitivanja
  • 2.1 Test katalaze
  • 2.2. Test oksidaze
  • 2.3 Ispitivanje soljenog manitolnog agara (MSA)
  • 2.4 Test koagulaze
  • 2.5. Test ureaze
• 3 Za što su biokemijski testovi??
• 4 Važnost
• 5 Reference

klasifikacija

Biokemijska ispitivanja mogu se podijeliti u 3 skupine:

univerzalan

To su testovi koji se mogu provesti na bilo kojem uzorku i koji usmjeravaju mikrobiologa na sljedeća biokemijska ispitivanja koja se moraju provesti kako bi se dobila pouzdana identifikacija..

primjer

Test katalaze i oksidaze.

razlike

To su testovi koji se provode kako bi se identificirali mikroorganizmi prisutni u uzorku do razine vrste.

Identifikacija se vrši na temelju rezultata kombinacije testova, budući da pojedinačni rezultati nisu dovoljno informativni za identifikaciju.

primjer

IMViC testovi i testovi korištenja šećera.

specifična

To su specifični testovi za određenu skupinu vrsta ili za podvrstu vrste. Ovi testovi se obično provode kako bi se potvrdila ili identificirala na razini podvrste. Pojedinačni testovi sami su informativni.

primjer

Ispitivanje γ-glutamil aminopeptidaze.

Vrste biokemijskih ispitivanja

Test katalaze

Test katalaze je test kojim se dokazuje prisutnost enzima katalaze razgradnjom vodikovog peroksida u kisik i vodu. Mala količina bakterija dodaje se kapi vodikovog peroksida (3%) na slajdu.

Katalazni test je jednostavan test koji koriste mikrobiolozi za identifikaciju bakterijskih vrsta i za određivanje sposobnosti nekih mikroba da razgrade vodikov peroksid produkcijom enzima katalaze..

Ako se promatraju mjehurići kisika, to znači da bakterija posjeduje enzim katalaze, jer katalizira razgradnju vodikovog peroksida u kisik i vodu. Tada se kaže da je organizam katalaza pozitivan (na primjer: Staphylococcus aureus).

Test oksidaze

Ovaj se test koristi za identifikaciju mikroorganizama koji sadrže enzim citokrom oksidazu (važan u lancu prijenosa elektrona). Obično se koristi za razlikovanje obitelji Enterobacteriaceae i Pseudomadaceae.

Citokrom oksidaza prenosi elektrone iz lanca prijenosa elektrona na kisik (konačni akceptor elektrona) i reducira ga u vodu. Testovi oksidaze osiguravaju umjetne molekule donora i akceptora elektrona.

Kada se donor elektrona oksidira djelovanjem citokrom oksidaze, medij postaje tamno ljubičasta i smatra se pozitivnim rezultatom. Mikroorganizam Pseudomonas aeruginosa Primjer je bakterije pozitivne oksidaze.

Test slanog manitolnog agara (MSA)

Ova vrsta ispitivanja je i selektivna i diferencijalna. MSP će odabrati organizme sposobne za život u sredinama s visokim koncentracijama soli, kao što su vrste Staphylococcus za razliku od vrste Streptococcus, čiji je rast inhibiran pod tim uvjetima.

Diferencijalna komponenta u ovom testu je šećerni manitol. Organizmi koji mogu upotrijebiti manitol kao izvor hrane proizvest će nusproizvode fermentacije, koji su kiseli i stoga će sniziti pH medija.

Kiselost medija uzrokuje da indikator pH, fenol crveni, postane žut. Primjeri vrsta bakterija koje se mogu razlikovati ovom metodom su: Staphylococcus aureus (pozitivno jer fermentira manitol) i Staphylococcus epidermidis (negativno jer manitol ne fermentira).

Test koagulaze

Koagulaza je enzim koji pomaže koagulaciju krvne plazme. Ovaj test se provodi na pozitivnim gram-pozitivnim bakterijama koje su pozitivne na katalazu i identificiraju se Staphylococcus aureus (pozitivna koagulaza) U stvari, koagulaza je faktor virulencije ove bakterijske vrste.

Nastajanje ugrušaka oko infekcije koju uzrokuje ova bakterija vjerojatno je štiti od fagocitoze. Ovaj test je vrlo koristan kada želite razlikovati Staphylococcus aureus drugih vrsta Staphylococcus koji su negativna koagulaza.

Test ureaze

Ovaj se test koristi za identifikaciju bakterija koje mogu hidrolizirati ureu, koristeći enzim ureazu. Obično se koristi za razlikovanje spola Protej drugih crijevnih bakterija.

Hidroliza ureje proizvodi amonijak kao jedan od njegovih proizvoda. Ta slaba baza povećava pH medija iznad 8,4, a pH indikator (fenol crveni) mijenja se iz žute u ružičastu. Primjer pozitivne bakterije ureaze je Proteus mirabilis.

Za što su biokemijski testovi??

Biokemijska ispitivanja u mikrobiologiji koriste se za dijagnosticiranje bolesti uzrokovanih mikroorganizmima i za praćenje liječenja koje se provode u borbi protiv njih. Osim toga, koriste se za probir zaraznih bolesti i njihovu prognozu..

Biokemijska identifikacija mikroorganizama daje ideju o tome što ti mikroorganizmi mogu učiniti, budući da je moguće razlikovati različite vrste istih vrsta od specifičnih biokemijskih profila..

Razlike u specifičnim enzimskim aktivnostima govore o ekologiji, fiziologiji ili prirodnom staništu mikroorganizma, što se u nekim slučajevima može smatrati važnim informacijama..

važnost

Strukturne razlike u odnosu na oblik, veličinu i raspored bakterija vrlo malo pomažu u procesu identifikacije, jer postoje mnoge vrste bakterija koje imaju sličan oblik, veličinu i raspored..

Iz tog razloga, identifikacija bakterija temelji se prvenstveno na razlikama u njihovim biokemijskim aktivnostima.

Svaka vrsta bakterija ima dobro definiran skup metaboličkih aktivnosti različit od svih drugih vrsta. Ti biokemijski "otisci prstiju" su svojstva koja kontroliraju bakterijski enzimi.

Dakle, biokemijski testovi su važni jer pomažu istraživaču da ispravno identificira patogene prisutne u uzorku i na taj način može preporučiti odgovarajući tretman pacijentu..

reference

1. Beckett, G., Walker, S. i Rae, P. (2010). Klinička biokemija (8. izdanje). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P.H. & Cowan, S.T. (1952). Biokemijske metode za bakteriologiju. Časopis za opću mikrobiologiju, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. i O'Reilly, J. (2013). Klinička biokemija (5. izd.). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. i Green, L. (2008). Praktični priručnik mikrobiologije (2. izd.). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Laboratorijske metode u mikrobiologiji hrane (3. izd.). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktična mikrobiologija. BI Publikacije Pvt Ltd.