Što je jednostavno bojenje? Glavne značajke



jednostavno bojanje je brz i jednostavan postupak bojenja u kojem se koristi jedna boja, zbog čega se naziva jednostavna. Uglavnom se koristi za određivanje morfologije i organizacije stanica prisutnih u uzorku.

Naravno, stanice nemaju boju, pa ih je potrebno učiniti vidljivim na neki način kada ih se promatra u mikroskopu.

Važno je naglasiti da boje koje se koriste u jednostavnom bojanju moraju biti bazične s pozitivnim nabojem (kationski), tako da se mogu spontano vezati za staničnu stijenku i citoplazmu..

Ove stanične strukture su negativno nabijene. Zato se boja, pozitivno nabijena, privlači stanicama i spontano se veže na njih. Tako su sve stanice prisutne u uzorku brzo obojene.

Boje se koriste u jednostavnom bojanju

Postoji nekoliko osnovnih boja koje se mogu koristiti u mikrobiološkom laboratoriju. Najviše se koriste:

- Metilensko plavo.

- Kristalno ljubičasta.

- Malahitna zelena.

- Osnovni fuksin.

Sve te boje dobro djeluju u bakterijama jer imaju pozitivno nabijene (kationske) obojene ione (kromofore).

Vrijeme obojenja za većinu ovih boja je relativno kratko. Obično se kreću od 30 sekundi do 2 minute, ovisno o afinitetu boje.

Važno je imati na umu da se prije bojenja uzorka jednostavnim bojanjem mora proširiti i učvrstiti na staklenu pločicu (klizač); Prošireni i fiksni uzorak naziva se razmaz.

6 koraka za izvođenje jednostavnog bojenja

1. korak

Postavite klizač na stalak za bojenje i nanesite željenu boju. Ostavite odgovarajuće vrijeme.

Uobičajeno, jednostavno bojenje traje nekoliko sekundi ili nekoliko minuta, ovisno o boji koja se koristi.

zapažanje

U ovom koraku važno je da se ne prekorači preporučeno vrijeme za upotrijebljenu boju, jer se kristali mogu formirati na listu, proizvodeći takozvane "artefakte" koji iskrivljuju morfologiju stanica..

Korak 2

Pažljivo isperite razmazanu posudu destiliranom vodom iz boce ili također vodom koja teku polako, dok otjecanje ne postane prozirno. To obično traje 5 do 10 sekundi.

zapažanje

Vodeni mlaz ne nanosite izravno na razmaz, kako biste spriječili oštećenje uzorka.

Ako nemate destiliranu vodu, možete koristiti vodu iz slavine bez ikakvih problema jer to neće utjecati na rezultat bojenja.

Korak 3

Osušite klizač s upijajućim papirnatim ručnicima u jednom smjeru i bez trljanja. Uvjerite se da je donji dio klizača čist.

4. korak

Promatrajte obojeni razmaz u mikroskopu. Počnite s najudaljenijim ciljevima kako biste ispravno locirali područje koje želite detaljnije promatrati. Promijenite cilj da se približite uzorku.

zapažanje

Za uporabu objektiva s najvećim povećanjem (normalno 100X), treba koristiti ulje za uranjanje, jer pomaže svjetlu da bolje prodre i slika je oštrija. Nije potrebno koristiti pokriće.

Korak 5

Konačno, odbacite sve uzorke u odgovarajući spremnik koji je propisno označen kao "biohazard".

reference

  1. (2001). Mikrobiološke primjene: Laboratorijski priručnik u općoj mikrobiologiji (8 th ed.). Tvrtke McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Uvod u praktičnu biotehnologiju (1st). Vatrozidni mediji.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D.P. (2009). Preliminarno bojenje bakterija: jednostavne mrlje. Aktualni protokoli u mikrobiologiji, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamove laboratorijske osnove mikrobiologije (10th). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorijske vježbe iz mikrobiologije (5 th). Tvrtke McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. i Mehrotra, R. (2009). Principi mikrobiologije (1st). Tata McGraw-Hill obrazovanje.