Agar Salmonella-Shigella temelj, priprema i uporaba



Salmonella-Shigella agar također poznat kao SS agar, je umjereno selektivan i diferencijalni medij, posebno dizajniran za izolaciju enteropatogenih bakterija iz roda Salmonella i Shigella, i iz ekoloških i iz kliničkih uzoraka..

SS agar ima složeni sastav; Sastoji se od ekstrakta mesa, peptona, laktoze, žučnih soli, natrijevog citrata, natrijevog tiosulfata, željezovog citrata, agara, neutralne crvene, svijetlo zelene i destilirane vode. S obzirom na veliku selektivnost, moguće je saditi uzorke s obilnom mješovitom florom.

U mikrobiološkim laboratorijima medij Salmonella-Shigella se široko koristi za ispitivanje prisutnosti Salmonelle i Shigella u uzorcima drvenih fecesa, kanalizacije, pitke vode i hrane..

Ponekad je potrebno upotrijebiti pred-obogaćene juhe (bujon za laktozu) i obogaćivanje (selenitni cistinski bujon) za oporavak sojeva salmonele.

Ovi koraci su potrebni kada se sumnja na postojanje Salmonelle u vrlo maloj količini, ili kada se soj može loše postupiti prema procesima tipičnim za industrijsku proizvodnju, uglavnom prerađenu hranu. Također je preporučljivo obogatiti uzorke stolice od pacijenata koji su liječeni antibioticima.

Nakon toga, obogaćena juha se može nasaditi na Salmonella-Shigella agar i druge slične medije, kao što su ksilozni agar, deoksisiloksan lizin (XLD) i enterički Hektoen agar (HE)..

indeks

  • 1 Temelj
    • 1.1
    • 1.2 Dosljednost
    • 1.3
    • 1.4 Diferencijalno
  • 2 Priprema
  • 3 Upotrijebite
  • 4 Ograničenja
  • 5 Kontrola kvalitete
  • 6 Reference

temelj

Svaka komponenta medija kulture Salmonella-Shigella ima specifičnu funkciju, a mješavina kao cjelina daje svojstva koja ga karakteriziraju..

Hranjiva moć

Ekstrakt mesa i pepton (digestirani kazein i životinjsko tkivo) osiguravaju potrebne hranjive tvari (nitrogeni, ugljik i vitamini) za razvoj mikroorganizama koji mogu tolerirati ostale sastojke.

dosljednost

Agar-agar je odgovoran za osiguravanje čvrste konzistencije medija.

selektivan

Ovaj medij je vrlo selektivan jer sadrži žučne soli, natrijev citrat i svijetlozelenu boju. Stoga inhibira rast svih Gram-pozitivnih bakterija i većinu gram-negativnih bacila, uključujući neke koliformne bakterije.

Dok bakterije roda Salmonella i neki sojevi Shigella podržavaju ove spojeve.

Uglavnom, roda Salmonella je vrlo otporna na žučne soli, toliko da su sposobni živjeti u žučnoj kesici nekih nositelja koji stalno izbacuju bakterije kroz izmet.

diferencijal

Laktoza je fermentirajući ugljikohidrat koji pomaže razlikovati sojeve za fermentaciju laktoze od ne-fermentirajućih sojeva. Ovo svojstvo dokazuje prisutnost pH indikatora, koji je u ovom mediju fenolno crven.

Sojevi za fermentaciju laktoze daju crvene kolonije, dok su ne-fermentirajući sojevi bezbojni. Ta je značajka važna jer Salmonella i Shigella ne fermentiraju laktozu.

S druge strane, ovaj medij sadrži natrijev tiosulfat kao izvor sumpora i željezov citrat kao izvor željeza. Oba spoja mogu razlikovati bakterije koje mogu proizvesti vodikov sulfid. Oni reagiraju tako da tvore crni precipitat netopljivog i vidljivog željeznog sulfida.

Ovo svojstvo ima neke sojeve roda Salmonella. Obično su njihove kolonije bezbojne, s crnom točkom u sredini. Ostali salmonele ne proizvode H2S i razvijaju se kao bezbojne kolonije.

S druge strane, kolonije roda Shigella su bezbojne, bez zacrnjenja.

priprema

To znači da je vrlo jednostavno pripremiti se.

Izvaže se 63 g dehidriranog komercijalnog medija i otopi u jednoj litri destilirane vode. Zagrijte otopinu i promiješajte. Smjesa može doći do ključanja do nekoliko minuta.

Ovaj medij ne smije autoklavirati. Nakon otapanja, poslužuje se izravno na jednostrukim ili dvostrukim sterilnim pločama.

Kada se učvrste, raspoređuju se na obrnut način u plakete i čuvaju u hladnjaku (2-8 ° C) dok se ne upotrijebe.

Medij nakon pripreme trebao bi biti pH 7,2 ± 0,2 i narančasto crven.

Važno je pustiti da se ploče ublaže prije sijanja uzoraka. Izvorni uzorak možete izravno posijati, a materijal ispustiti na dio agara, a zatim odatle iscrpljivati.

U slučaju korištenja obogaćenih bujona, proći dio selenitne juhe i posijati drigalskom lopaticom.

Inkubirajte 24 sata pri 37 ° C u aerobiozi.

Imajte na umu da količina grama za vaganje i konačni pH medija može varirati od jedne komercijalne kuće do druge. Osnovna ploča medija uvijek donosi indikacije za njezinu pripremu.

upotreba

Često se koristi u analizi kultura stolice i mikrobiološkom ispitivanju uzoraka zaostale vode, pitke vode i hrane.

Često se pripremaju dvostruke ploče, s jedne strane postavlja se agar Salmonella-Shigella, as druge strane XLD agar.

ograničenja

-Neki sojevi Shigella ne rastu u ovom mediju. Stoga se ne preporučuje za primarnu izolaciju ovog roda.

-Nije svaka jasna kolonija s crnim središtem indikativna za salmonelu; moraju se provesti biokemijska ispitivanja kako bi se utvrdila ispravnost, budući da se kolonije nekih sojeva Proteusa ne mogu razlikovati od kolonija Salmonelle.

-Dehidrirani medij treba paziti na izlaganje okolini, jer je vrlo higroskopan. Stoga se mora čuvati u suhom i dobro zatvorenom prostoru. Otvoreno vrlo kratko.

-S vremenom se žučne soli u mediju mogu precipitirati, formirajući sliku sličnu matiranoj u agaru, ali to ne utječe na rezultate.

-Neki sojevi Shigella mogu polako fermentirati laktozu.

Kontrola kvalitete

Da bi se dokazalo da medij funkcionira ispravno, preporučljivo je posaditi poznate ili certificirane kontrolne sojeve i promatrati ako rast zadovoljava očekivane karakteristike.

U tu svrhu, sojevi E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella Typhimurium ili Enterococcus faecalis.

Očekivani rezultati su:

Escherichia coli --ružičaste konveksne kolonije.

Enterobacter i Klebsiella- velike kolonije i crvena ili ružičasta sluznica.

Shigella flexneri --ravne ili bezbojne ravne kolonije.

Salmonella typhimurium - bezbojne kolonije sa crnim središtem.

Enterococcus faecalis-- totalna inhibicija.

reference

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Dostupno na: f-soria.es
  2. Laboratorij BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Dostupno na: bd.com
  3. Laboratories Britania. Agar Salmonella-Shigella. 2015. Dostupno na: britanialab.com
  4. Valtek dijagnostika. Salmonella-Shigella agar (SS agar) .2010. Dostupno na: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka dijagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Uvodnik Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka dijagnoza. 5. izd. Uvodnik Panamericana S.A. Argentina.